多聚糖是由单糖组成的碳水化合物，根据组成和键合位置的不同可排列成多种不同的低聚糖结构。N-糖或 O-糖非还原末端的唾液酸封端可在介导治疗性糖蛋白的有效性中发挥非常重要的作用。根据分子和应用的不同，末端唾液酸可能会降低清除率，降低抗体依赖性细胞毒性 (ADCC) 活性或具有抗炎作用。

 

在生物治疗药物中发现的两种常见唾液酸是 N-乙酰神经氨酸（NANA 或Neu5Ac）和 N-羟乙酰神经氨酸（NGNA 或 Neu5Gc）。Neu5Ac 通常为主要形态，而 Neu5Gc 不能由人类合成，它存在于生物治疗药物中使其可能具有免疫原性。因此，对治疗性糖蛋白中唾液酸的绝对含量以及不同唾液酸种类的含量的监测都至关重要。

 

灵敏、高通量的唾液酸分析与定量方法？Get！

 

Agilent AdvanceBio 唾液酸分析与定量试剂盒（部件号 GS24-SAP）为唾液酸的分析与定量提供了一种灵敏的高通量方法。通过酸水解从糖蛋白中释放出唾液酸，然后用荧光团 1,2-二氨基-4,5-亚甲基二氧基苯 (DMB) 对其进行衍生化，从而可以通过具有荧光检测 (FLD) 和可选的质谱 (MS) 检测功能的反相 (RP) 液相色谱进行分离。

 

检测优势：

 

– 工作流程（包括温育期）可在约 5 个小时内完成

 

– 1–2000 pmol 的宽唾液酸检测范围

 

– 对唾液酸化水平较低的蛋白质的检测灵敏度可达皮摩尔级

 

规格：

 

96 孔板形式

 

试剂盒中包括预分配的 NANA 和 NGNA定量标准品

 

试剂盒中包括唾液酸定性分析参比组合

 

所需的设备和样品前处理注意事项

 

AdvanceBio 唾液酸分析与定量试剂盒适用于多种不同的样品类型，包括糖蛋白、糖肽、糖脂、聚唾液酸以及全细胞。

 

根据样品类型和浓度的不同，可能需要对高度唾液酸化的样品进行稀释，而对于唾液酸化水平较低的单克隆抗体等样品则可能需要通过干燥和复溶于少量去离子水中对其进行浓缩。按照推荐的使用方式，该试剂盒包含的试剂足够用于生成 24 个数据点。这足以将 6 个样品各平行制备三份，或将 9 个样品各平行制备两份，更多详情请参阅说明书。本方法的动态范围为 1–2000 pmol 唾液酸/样品孔。

 

用户需要提供的设备包括能够为所需的温育步骤提供 50 °C 和 80 °C恒定温度的热循环仪或带盖加热模块。分析需要使用具有荧光检测功能的分析型 HPLC 系统（HPLC 或 UHPLC），如需了解更多信息，请参阅说明书。