岛津:北京大学化学与分子工程学院刘虎威教授答疑液相色谱
1.请问我们用LC测样,同样的样品和分离条件,一开始样品分离度峰形都很好,但是使用三四次后就有峰分叉,一般来说是什么原因造成的?
答:原因一,色谱柱性能降低了,很可能柱头的填料在高压下多孔硅胶颗粒破碎了(压力较高),造成了死体积。这种情况下换柱子是解决办法。原因二,溶解样品的溶剂不太合适,比如反相色谱条件,样品溶剂比流动相的洗脱能力强。这种情况下同流动相溶解样品就可以避免这个问题。原因三,进样量过大。减少进样量是解决办法。
2.液相色谱在优化条件时峰是分开的,加入标准品后用同样条件进样一次发现峰连在一起,分不开了,原因是什么?
答:可能是先前优化时样品浓度不高,分离度刚好1.5,加入标准品后浓度高了,峰宽了,就分不开了。也可能是色谱柱性能刚好下降了。还可能是优化分离是分开的峰并不是标准品对应的组分,加入标准品后多了一个峰。
3.乙腈保存对液相泵有影响吗?
答:用纯乙腈是有一点影响。主要是泵的密封圈在纯乙腈中时间长了会有一定程度的溶胀,老化速度加快。
4.长期用乙腈保存,液相的泵为什么会堵?
答:应该不会。之所以堵了,可能是系统管线被污染了,长期保存的乙腈挥发掉以后,溶解的污染物析出,造成堵塞。也可能泵密封圈的老化降解产物造成堵塞。如果是这种情况,那无论那个厂家的泵都有可能发生。
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