贝克曼PEG浓缩法
PEG浓缩法
聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）是一种无电荷的线性分子结构的多糖，为乙二醇的聚合物，具有高亲水性，在溶液中会吸收大量水分，减少病毒之间的距离，使病毒聚合在一起，提高病毒的相对浓度，达到沉淀浓缩的目的。
基本流程：
1.收集病毒上清液，使用0.45 μm滤膜过滤，除去细胞及细胞碎片。
2.将上清液与40% PEG溶液混合（可使用PEG8000、4000或6000），最终PEG浓度为10%。冰上放置3到6小时。
3.放于Avanti J-15R离心机中，2000 ×g 离心30 min。
4.去掉上清，使用1/20原始样品体积的PBS缓冲液对离心后形成的沉淀进行重悬。
5.为了进一步浓缩，将重悬后的病毒样品转移到已预先消毒的超速离心管（Ultra-Clear Tube #344058）中，并使用PBS缓冲液进行配平。
（注：可选用无菌无酶离心管 #C14292）
6.按次序将超速离心管放置于SW 32 Ti的吊桶中。
7.将装有病毒样品的SW 32 Ti转头放置于Optima XPN-100超速离心机中，100,000 ×g（24,500 rpm）离心90 min。
8.直接倾倒或使用移液器小心去除上清，注意不要将病毒颗粒倒出。
9.使用PBS或其他病毒存储液重悬沉淀，并将所有管中的样品集中在一个离心管中。
10.集中的病毒样品分装后，-80℃保存备用。
蔗糖垫液离心法
为更好地保持病毒颗粒形态与结构的完整性，超速离心浓缩时经常在管底加入蔗糖垫液，使病毒样品在到达管底时沉降减速或不形成沉淀。
基本流程：
1.收集病毒上清液，使用0.45 μm滤膜过滤，除去细胞及细胞碎片。
2.在已预先灭菌的超速离心管（Ultra-Clear Tube #344058）底部小心加入3-5 ml 20%蔗糖垫液。
（注：可选用无菌无酶离心管 #C14292）
3.小心地将病毒上清液加至离心管中蔗糖垫液上。
4.将超速离心管配平后小心放入吊桶中。
5.将装有病毒样品的SW 32 Ti转头放置于Optima XPN-100超速离心机中，4℃，125,000 ×g离心90 min。
6.直接倾倒或使用移液器小心去除上清，注意不要将病毒颗粒倒出。
7.加入PBS或其他病毒存储液重悬沉淀，可选择在4℃下溶解2小时，每20分钟轻轻震荡。
8.对离心得到的病毒样品进行分装，-80℃保存备用。
Optima XPN-100
最高转速：100,000 rpm
最大相对离心力：802,400 ×g
15寸液晶显示屏
内置离心专家软件
SW 32 Ti 水平转头
最高转速：32,000 rpm
最大相对离心力：175,000 ×g
最大容量：6 × 38.5 mL
安全、高效的插入式转头
(责任编辑：金利仪器lyh)
