枸杞，又称枸杞子、红耳坠，是茄科小灌木枸杞的成熟子实。枸杞子药食同源的历史悠久，是驰名中外的名贵中药材，早在《神农本草经》中就被列为上品，称其为“久服轻身不老、耐寒暑”；有延衰抗老的功效，又名“却老子”。枸杞子中含有多种氨基酸，并含有甜菜碱、玉蜀黍黄素、酸浆果红素等特殊营养成分，使其具有非常好的保健功效。随着大家对枸杞营养价值的认识，养生群体越来越大，对枸杞的需求日渐增多，枸杞中的农药残留也越来越受到大家的关注。

 

       本文依据2020版《中国药典》2341通则农药残留量测定法新增第五法《药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法》中的快速样品处理法（QuEChERS），建立了枸杞中33种禁用农药及其单体残留量的测定方法，保证了枸杞食用的安全性。

 

       枸杞试样用1%的冰醋酸水溶液进行浸泡使其充分浸湿，再用乙腈进行提取，以无水硫酸镁、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶、硅胶、石墨化碳黑的混合粉末进行分散式固相萃取净化，最后用AutoEVA-20Plus全自动平行浓缩仪对提取液进行浓缩。实验结果表明，33种禁用农药在20-200ppb内线性关系良好，相关系数（R2>0.990）。除了杀虫脒和氟虫腈砜之外，其他化合物的回收率均在70-120%之间，RSD在15%以内。该方法简单、快速、高效，且准确度和精密度均符合农药多残留的检测要求，可用于枸杞中多农残的快速筛查和测定。

 

       划重点

       01仪器、试剂

 

       1仪器

       Raykol AutoEVA-20Plus全自动平行浓缩仪

       Agilent 1290+6470高效液相色谱/质谱联用仪

       Agilent 8890+7000D气相色谱/质谱联用仪

       涡旋仪

       离心机

       2试剂

       乙腈（HPLC）、冰醋酸（AR）、超纯水

       RayCureTM QuEChERS提取盐包（6g无水硫酸镁+1.5g无水醋酸钠）

       RayCureTM QuEChERS分散式固相萃取净化管

       陶瓷均质子

       GC-MS/MS法33种农药混合标准储备液：0.2/0.4/1.0 μg/mL

       LC-MS/MS法30种农药混合标准储备液：0.2/0.4/1.0 μg/mL

       GC-MS/MS法内标使用液：磷酸三苯酯 0.1 μg/mL

       划重点

       02样品前处理

       1  准确称取枸杞试样3 g，加入15mL 1%冰醋酸溶液，涡旋混匀并震荡2 min，静置30 min

       2  准确加入乙腈15 mL，涡旋混匀并震荡5 min

       3  加入RayCureTM提取盐包和一颗陶瓷均质子，立即摇散，震荡1 min后置于冰水浴中10 min

       4  4000 r/min离心5 min，取上清液9 mL置于净化管中，涡旋使充分混匀，并震荡5 min使净化完全

       5  放冷的样液转移至10 mL容量瓶中，用乙腈多次润洗浓缩杯并转移至容量瓶中，最终用乙腈定容至刻度。

       6  将净化管4000 r/min离心5 min，准确吸取上清液5 mL转移至20 mL玻璃试管中

       7  使用睿科AutoEVA-20Plus全自动平行浓缩仪氮吹至约0.4mL后取出，加乙腈稀释定容至1 mL

 

       划重点

       03检测条件

       气质联用色谱图

       液质联用色谱图

 

       划重点

       04样品测试

       提取液净化

 

       枸杞基质较为复杂，含有大量的糖类、蛋白质和色素，所以共萃取物较多。

       一方面基质残留会使得目标化合物的响应被抑制或者增强，而农药是容易受到基质影响的分析物；

       另一方面杂质会在色谱柱中积聚，也会缩短色谱柱的寿命。

       本实验采用RayCure分散式固相萃取净化管对提取液进行净化，提高色谱柱的寿命。该净化柱的填料为复合填料，由无水硫酸镁、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷键合硅胶、硅胶、石墨化碳黑混合。其中，无水MgSO4起到吸收水分的作用，以保证上气质前样品不含水分；C18可以去除样品基质中的脂肪和脂类等非极性干扰物；PSA可以去除糖类、脂肪酸、有机酸和酚类等干扰物质；GCB可以去除色素和甾醇。提取液为黄色，经过化后提取液几乎为无色透明的溶液，说明该枸杞提取液被充分净化。

 

       在枸杞样品中添加浓度为40 μg/kg的33种农药（GC-MS/MS）和20 μg/kg的30种农药（LC-MS/MS）进行加标回收验证

 

       划重点

       05总结

       样品在加入提取盐包后要立即摇散，否则容易结块。使用陶瓷均质子可以防止萃取盐结块，并能够均匀地分散样品，提高萃取效率，降低人力成本。

       加入提取盐包后会放出大量的热，所以振荡后需尽快放入冰水浴中冷却，或者用预冷的乙腈，防止对热不稳定化合物造成影响。

       在氮吹浓缩过程中，温度不能超过40°C，氮气压力不能过大，浓缩时注意不能吹干，否则将导致部分化合物损失。

 

       划重点

       06解决方案优势

 

       本解决方案高效，提取和净化效果优异。AutoEVA 20Plus全自动平行浓缩仪可以实现30个样品同时浓缩，极大的提高了浓缩效率，并且仪器可实现针随液面的高度下降，加快浓缩速度，节约氮气成本；人性化的可视化窗口设计可以看到样品浓缩剩余体积，避免吹干。RayCureTM QuEChERS提取盐包和净化管采用进口高品质填料，严格按照药典标准进行等量封装，即拿即用，提取和净化效果好，可以节约宝贵的人力资源和时间成本。