孔雀石绿和结晶紫均为人工合成的有机化合物，属于三苯甲烷类化学物，既是染料，也是杀真菌、杀细菌、杀寄生虫的药物。2019年12月27日，孔雀石绿被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单[1]。毒理学实验表明，结晶紫是一种剂量相关的致癌物质， 应避免长期、大剂量和大面积使用。本文建立了孔雀石绿和结晶紫残留量的测定方法。
关键词：
孔雀石绿，结晶紫，ShimNex CS C18，HPLC，荧光检测器
实验部分Part One
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪（RF-20A荧光检测器）；
色谱柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （货号：380-01230-01）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（货号：380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（货号：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（货号：380-00751-02），SHIMSEN Pipet PMII-100（货号：380-00751-04），SHIMSEN Pipet PMII-1000（货号：380-00751-06）。
1.2 对照品溶液的制备
取隐色孔雀石绿和隐色结晶紫对照品适量加乙腈制成每1 mL含隐色孔雀石绿和隐色结晶紫各0.1 μg的溶液。
1.3 分析条件
色谱柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （货号：380-01230-01）
柱温：35℃
检测器：激发波长265 nm；发射波长360 nm
流速：1.3 mL/min
进样量：20 μL
流动相：A：0.05 M乙酸铵缓冲液（pH 4.5），B：乙腈，A：B = 20：80
本文建立了水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定的HPLC-荧光检测器方法。参照GB/T 20361-2006中的色谱条件，采用色谱柱ShimNex CS C18 对孔雀石绿、结晶紫的衍生产物隐色孔雀石绿、隐色结晶紫进行分析。结果显示各组分峰形和重现性良好，分离度大于 1.5 满足检测要求。此方法可为水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定提供参考。
